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实现常规荧光共聚焦成像和快速光谱成像的完美结合

随着科研人员需求的不断增加,探测到更多的信号甚至是光谱信息变得越来越必要,尤其在区分颜色比较接近的荧光的时候。创新的A1si激光共聚焦显微镜带给用户的灵活性,高速度以及光谱功能,远远超出常规共聚焦显微镜。配备的常规荧光探测器和光谱探测器,可以满足多种科研领域的应用需求。

单次扫描即可获得320nm带宽的光谱图像
波长分辨率可以是2.5, 5,和 10 nm. 选用10 nm分辨率时, 单次扫描可获得的波长范围高达320 nm,远远超出其他类似系统。
1) 简单,灵活的显微镜控制
只需单击一个图标,即可实现目镜观察和共聚焦拍摄之间的光路切换。通过A1si的系统软件,用户可以轻松控制显微镜的各个部件,将更多的时间用于拍摄图像。
2) 透射光拍摄
在拍摄光谱图像和标准共聚焦图像的同时,A1si还可以拍摄包括DIC,明视场,相差在内的透射光图像,以便在组织和细胞中更好的进行荧光标记的定位。
3) FRAP观察
通过macro程序,可以进行FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching光漂白后的荧光恢复) 实验. 激光精确定位到用户指定的任意区域(圆形,矩形,任意多边形,点,线,甚至环形)进行光漂白。其他FRAP技术,包括iFRAP (interval FRAP) 和FLIP (Fluorescence loss in Photobleaching)同样得到支持。
4) 对光谱图像进行时间动态记录
由于单次拍摄即可得到全光谱图像,所以A1si可以对光谱图像进行动态拍摄。拍摄时间序列的模式有:最快模式/固定时间间隔模式/用户自定义拍摄时间表模式)
5) 对荧光信号进行光谱拆分,消除串色
A1si 软件可以将不同荧光探针的信号清楚地拆分开,包括光谱接近,大范围重叠的荧光信号(比如CFP, RFP, YFP,和 Alexa488). 在观察多重荧光染色来定位蛋白分子, FRET 实验时,这个功能非常有用.通过光谱拆分,还可以清除掉自发荧光信号。
6) 高效率的荧光透过技术
荧光光纤和探测器表面都使用了高效防反射涂层,将荧光信号的损失降到最低,实现光路的高透过率。
7) 高波长分辨率
通过使用精密设计的衍射光栅,可以实现高达2.5nm的光谱分辨率.此外还有5nm 和 10nm分辨率可选。不同的分辨率可以分别用来拆分光谱重叠的探针或同时对4个或更多的探针进行拍摄。
8) 采用偏光控制技术的光谱探测器
Nikon的DEES (Diffraction Efficiency Enhancement System衍射效率增强系统) 专利技术可以对偏振光进行控制,从而实现亮度的最大化。通过调整偏振光方向,衍射光栅的效率得到最优化,从而在从蓝到红的整个可见光范围内提高广谱数据的亮度和线性。
9) 拍摄到真实的荧光颜色
由于采用了新的精确矫正技术,而且光谱分辨率和针孔大小无关,A1si可以精确探测到光谱信号,得到真实颜色。同其他的伪彩色系统相比,A1si可以实时观察到真彩色的样本。
用 A1si得到的广谱数据和探针制造商提供的数据非常接近。
10) 把对活细胞和组织的影响降到最低
通过单次激发就可以得到全光谱图像,因此激光强度和PMT增益的调节变得简单而快速。同时把荧光信号的衰减以及激光对标本的损伤降到最低。对于活细胞和组织,A1si是一套“温柔”的系统。
11) 同时拍摄32通道的光谱图像
A1si 采用了32 通道PMT,并革新了多重高速数字转换电路和LVDS(Low Voltage Differential Signal低压差分信号)高速串行传输技术,创造性地实现了单词扫描得到32通道光谱信息,大大减少了拍摄时间,并实现了实时观察。
12) 双积分信号处理
新开发的DISP (Dual Integration Signal Processing双积分信号处理) 技术提高了电子效率,避免了模/数转换过程中荧光信号的损失。整个曝光期间,荧光信号得到全程记录,有效提高了信噪比。
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