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差示扫描量热法(DSC)是一种用来表征蛋白质和其他分子稳定性的强大分析工具。 MicroCal VP-DSC 提供快速、准确的跃迁点(Tm)确定功能,可生成样品的热力学信息,让我们能够深入了解影响构象和稳定性的因素。
MicroCal VP-DSC支持无标签研究自然状态的分子,可用于彩色溶液或浑浊的悬浮液。 它可测量极其严格的结合常数,最高可达1020M-1。 上样后无需操作节省了操作人员的时间,并且整个系统不需要其它配件、试剂或耗材。
典型应用包括测定蛋白质稳定性和去折叠热力学特性、抗体域结构测定、膜和脂质鉴定和超紧密分子相互作用的测量。
- 非反应性钽池提供出色的耐化学性。
- 池固定在原位,给出可再生和超灵敏的性能, 并只需低程度维护。
- 有三个用户可选的响应时间,实现最佳性能。
- 用户可选的温度扫描速率和范围,应用多样性。
- 自持式增压系统(0.46 psi),适于研究温度高于沸点的溶液。
- 可提供用于测定微分比容的压力扰动量热附件。
- 帕帖尔元件保证精确的温度。
- 包括 MicroCal Thermovac™ 样品制备和清洗装置。
- 通过VPViewer™软件控制,通过Origin®进行数据分析。
- Tm飘移配体结合筛选。
工作原理:
MicroCal VP-DSC用于研究生物分子的分子内稳定性。 它提供快速准确的跃迁点(Tm)测定并生成热力学信息,以便让我们能够深入了解影响构象和稳定性的因素。
溶液中的生物分子在其自然(折叠)构象和变性(去折叠)构象之间保持平衡。 测得的热跃迁中点(Tm)可提供快速、简易的稳定性指示。 Tm值越大,生物分子越稳定。
测量原理
由蛋白质和其他大分子形成的清晰结构经历温度诱导的构象变化,如去折叠。 这些变化造成非共价键重新分配, 从而导致热吸收。 差示扫描量热仪测量这种热量的吸收。
MicroCal VP-Capillary DSC的热核心包括参比池和样品池,均封装在一个绝缘夹套中。 该装置设计成始终保持两池处于相同温度。 测量过程中,参比池和样品池同时以恒定的扫描速率加热。 样品分子去折叠时,吸收热量,样品池和参比池间形成温差(ΔT)。 这就导致整个帕帖尔单元内部形成热梯度,对两池进行冷却和加热,从而形成电压。 电压被转化为电功率,控制帕帖尔单元将ΔT(温差)恢复为0。
例如,由于蛋白质去折叠是一个吸热事件,在信号中观察是一个正位移(热容)。 该“溶解”跃迁的中点为Tm,曲线下的面积就是该过程的焓(ΔH)。